胎牛血清是通過母牛剖腹產胎牛心臟密閉穿刺采血獲得的新鮮胎牛全血,經自然層析、離心后收集得到去除血細胞、纖維蛋白等成分的淡黃色透明上清液體,后經生產使用多級高置流膜過濾技術和三級0.1?m終端微濾方法處理后,常用于細胞培養相關實驗。
胎牛血清是細胞培養中常用的天然培養基,因為胎牛未進食過母乳,所以IgG含量低,且含有豐富的細胞生長必須的營養成份,故目前多數實驗人員選擇的都是胎牛血清進行動物細胞的體外培養,具有極為重要的功能。
1.提供對維持細胞指數生長的激素,基礎培養基中沒有或量很少的營養物,以及主要的低分子營養物。
2. 提供結合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結合或調變它們所結合的物質活力。
3. 有些情況下結合蛋白質能與有毒金屬和熱原質結合,起到解毒作用。
4. 是細胞貼壁、鋪展在塑料培養基質上所需因子來源。
5. 起酸堿度緩沖液作用。
6. 提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩余胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。
非正規胎牛血清的產品會存在很多的問題:
1)疫區來源,無合格質檢使胎牛血清存在生物學污染:支原體、噬菌體、病毒、原蟲等,會直接影響實驗的結果和穩定。
2)采血工藝不規范,導致采集的原血放置時間過長或操作不當導致溶血,血液中血細胞裂解,胎牛血清顏色呈紅色或暗紅色,這樣的血清含有許多胞內產物,里面很多物質都會對細胞有刺激作用,影響實驗的穩定性和數據的真實性。
3)血清批次不穩定,添加來補?
很多不法商販拿到低廉的疫區原料血清進行加工生產,為了保障血清的培養效果會對血清進行處理,較常見的是添加激素、轉鐵蛋白、BSA、生長因子等,還有的會和新生牛血清、培養基等勾兌,更有甚者用的根本就不是牛血清,此類操作對所有生物學實驗都有巨大的影響。
不管是國外還是國內血清生產標準都要求不得添加任何外源成分,以前某品牌就有前車之鑒,他們在血清中加入大量細胞因子和生長因子,導致細胞瘋長,但是做細胞功能性實驗,結果卻慘不忍睹。目前該品牌已經被取締,但這種情況在非正規渠道胎牛血清身上屢禁不止。