胎牛血清細胞在體外培養時,必須營造一個與體內相適應的培養環境。細胞本身是一個生命,是組成機體的zui小生命單位,如果細胞長期在較高內毒素含量的培養基中生長,久而久之,細胞的正常生長繁殖受到干擾,甚至zui終導致變異死亡。
為何牛血清中會污染噬菌體,其危害表現在什么地方
噬菌體是感染細菌的病毒,牛血清中污染噬菌體,表明該牛血清曾受到細菌污染,而受細菌污染過的牛血清,不僅對固有的營養成分有所損害,更重要的是牛血清中會因細菌污染而含有許多毒素,對細胞生長不利。牛血清是否污染噬菌體是檢測牛血清在整個加工過程中有否受到外源性污染的一個重要指標。
胎牛血清是細胞培養中zui重要的原輔材料,牛血清若污染支原體會使培養的細胞受感染。導致細胞病變而死亡,使科研和生產工作無法繼續進行。
胎牛血清冷凍管應如何解凍
取出冷凍管后,必須立即放入37℃水浴中快速解凍,輕搖冷凍管使其在一分鐘內全部融化,并注意水面不可超過冷凍管蓋沿,否則易發生污染情形。此外,冷凍管由液氮罐中取出解凍時,必須注意安全,以預防冷凍管爆裂。
細胞冷凍管解凍培養時,是否應馬上去除DMSO
除少數特別注明對DMSO敏感的細胞外,絕大部分細胞株(包括懸浮性細胞),在解凍之后,直接放入含有10%血清的新鮮培養基的瓶中即可。待隔天再置換新鮮培養基以去除DMSO,避免離心后損傷細胞。
培養原代細胞中出現小黑點,可能是原代組織中的雜質,多次傳代可以消除。
胎牛血清細胞培養中如何防止黑點生成
1. 盡可能地減少血清凍融次數。
2. 培養基無需37℃水浴。
3. 培養基保持*PH值7.0- 7.2。
4. 嚴格控制配制培養基的水質,容器定期刷洗。
5. 胎牛血清掌握細胞傳代的*時機,細胞切勿生長過老。