蛋白酶K是一種從白色念 珠菌分離出來的強(qiáng)力蛋白溶解酶，具有很高 的比活性，是DNA提取的關(guān)鍵試劑。該酶 在較廣的pH范圍（4?12.5)內(nèi)及高溫 (50?70°C)均有活性，用于質(zhì)粒或基因組 DNA、RNA的分離。在DNA提取中，主 要作用是酶解與核酸結(jié)合的組蛋白，使 DNA游離在溶液中，隨后用不同方法進(jìn)行 抽提，除去雜質(zhì)，收集DNA。EDTA等螯 合劑或SDS等去垢劑均不能使之失活。蛋 白酶K貯存液一般為10mg/ml或20mg/ml。 貯存于一20°C。蛋白酶K溶液為無色透明， 如出現(xiàn)沉淀就不能再使用。

作用

值得注意的是，蛋白酶K在原位雜交技術(shù)中通常用于雜交前的處理,它具有消化包圍靶DNA蛋白質(zhì)的作用,以增加探針與靶核酸結(jié)合的機(jī)會,提高雜交信號.但蛋白酶K的濃度過高、消化時(shí)間過長或孵育溫度過高時(shí),都會對細(xì)胞的結(jié)構(gòu)有一定的破壞,導(dǎo)致組織切片的脫落,細(xì)胞核的消失,從而影響雜交結(jié)果.EDTA緩沖液可以替代蛋白酶K的作用,解決上述出現(xiàn)的問題,并能達(dá)到理想的染色效果。

應(yīng)用

蛋白酶K已廣泛應(yīng)用在皮革、毛皮、絲綢、醫(yī)藥、食品、釀造等方面。皮革工業(yè)的脫毛和軟化已大量利用蛋白酶，既節(jié)省時(shí)間，又改善勞動衛(wèi)生條件。蛋白酶還可用于蠶絲脫膠、肉類嫩化、酒類澄清。臨床上可作藥用，如用胃蛋白酶治療消化不良，用酸性蛋白酶治療支氣管炎，用彈性蛋白酶治療脈管炎以及用胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶對外科化膿性創(chuàng)口的凈化及胸腔間漿膜粘連的治療。加酶洗衣粉是洗滌劑中的新產(chǎn)品，含堿性蛋白酶，能去除衣物上的血.漬和蛋白污物，但使用時(shí)注意不要接觸皮膚，以免損傷皮膚表面的蛋白質(zhì)，引起皮疹、濕疹等過敏現(xiàn)象。